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异硫氰酸胍,GITC

异硫氰酸胍

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异硫氰酸胍

CAS: 593-84-0

别名:硫氰酸胍

Guandine throcyanate 简称 GITC   

分子式:CH5N3·HSCN   分子量:118.16   

外观:白色结晶   熔点:115-120℃   PH(4%水溶液):4.5-7.0   

紫外吸收(300nm,6M):≤0.1 abs unit   

紫外吸收(410nm,6M):≤0.05abs unit   

干燥失重:≤0.5%   

用途:用于变性裂解细胞;提取RNA和DNA。无RNA酶和DNA酶活性   TRIzol是一种新型总RNA抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。

异硫氰酸胍法提取同时提取DNA病毒和RNA病毒核酸

随着分子生物学的快速发展,基因诊断成为检测动物疫病最准确而有效地手段,进行基因诊断的过程中,病毒核酸的提取是进行检测的前提条件,核酸提取的质量也影响检测的准确性。

当前,动物病毒核酸提取方法主要有经典Trizol提取法和以Trizol作为裂解液的硅胶模柱式提取法两种方法。经典Trizol提取法过程繁琐、周期长、提取效率低、技术要求高,以Trizol作为裂解液的硅胶模柱式提取法成本较高、提取RNA的质量不高、且只能提取RNA病毒。

一种同时提取血清、双拭子中动物DNA病毒和RNA病毒核酸的方法,包括步骤:对待提取物使用异硫氰酸胍裂解液裂解;硅胶膜吸附RNA;洗液Ⅰ除去杂蛋白;洗液Ⅱ洗去杂质;DEPC水洗脱核 酸;上述异硫氰酸胍裂解液包括3-7M异硫氰酸胍、0.6%-1.0%TriTon-100、30-50mM Tris-Cl、5-15mM DTT、60-90μg/mL蛋白酶K、10-30mM EDTA,PH在4.3-4.6。

上述洗液Ⅰ包括5-6M盐酸胍,53-59%无水乙醇,K70-90μg/mL蛋白酶,PH在6.4-6.6;上述洗液Ⅱ包括70-80%乙醇。

进一步地,上述异硫氰酸胍裂解液包括5M异硫氰酸胍、0.8%TriTon-100、40mM Tris-Cl、10mM DTT、80μg/mL蛋白酶K、20mM EDTA,pH在4.5。进一步地,上述洗液Ⅰ包括5.5M盐酸胍,56%无水乙醇,80μg/mL蛋白酶K,PH在6.5。进一步地,上述洗液Ⅱ包括75%乙醇。

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异硫氰酸胍,GITC

(2021-06-18)
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